标本对生化检验结果的影响
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标本采集对生化检验结果的影响
采集时间
同一患者在不同时间所采集标本的检验结果会有明显的差异,为了尽可能取得检验条件的一致性,生化检验原则上都是于清晨早餐前或进食12h后采集。这是因为进食后血液中的某些化学成分有较大幅度的波动,而饮水还可使血液稀释,所以此期间血液成分的波动不应忽视,此外在临床上血液生化指标参考值的调查与界定,通常以空腹血样的检测值为统计样本。但是在某些急诊情况下,为了争取抢救时间,接诊后需立即进行治疗,且同时需要进一步生化检查以判断病情的'发展和预后,此时应该注意输液及药物对生化检验结果的影响,尽量在输液及药物治疗之前采取标本并立即送检。
饮食后大量葡萄糖及脂类物质吸收入血,使血 糖和血脂上升,游离脂肪酸及无机磷降低;运动后会使乳酸、丙酮酸、乳酸脱氢酶、转氨酶、肌酸激酶等升高,血糖降低;昼夜变化大的成份有皮质醇、血清铁、胆红素等;日间变化大的主要是代谢废物成份如尿素、尿酸等;大量饮水可致血液稀释等等。所以,做血液生化检验时应掌握好采血时间。
采集部位 实际工作中有时能遇到患者短时间内生化结果出现较大幅度的波动,分析其原因除患者病情的急剧变化和静脉补充液体的影响外,血标本的采集部位也是一个重要原因。临床上常有危重患者需要多通道输液,在采集他们的血标本出现困难时,有些标本是从输液侧肢体甚至输液的同一条静脉取血,这样血液稀释和输液药物的影响将会使检验结果出现很大的误差。所以在采集血标本时应尽可能避免在补液侧肢体采血。
标本处理对生化检验结果的影响
标本处理
检验科收到标本后如果先45℃水浴10min,再3000rpm离心5min即可使血清LDH、K+浓度显著升高,因此只需要低速离心分离血清即可。
标本储存
标本分离前放置太久可造成溶血,另外,由于葡萄糖的酵解作用和细胞对葡萄糖的利用导致标本采集后的血液葡萄糖浓度进行性下降,有报道全血样品中葡萄糖在室温下条件下,每小时约酵解5%;Na+、Cl-、K+静置2-3h后则会有明显上升的趋势。血清蛋白对酶蛋白有一定的稳定作用,如果没有细菌污染,大部分酶存在于清蛋白中可在室温下保存1-3天而活性不受影响,但是也有有些酶如CK放置4h后其活性明显下降;前列腺酸性磷酸酶极不稳定,在离体后较短的.时间内活性即明显下降,此外大部分酶在低温下比室温更稳定,但有些酶如醛缩酶(ALD)在低温下特别是-20℃冰冻时,可引起不可逆性失活;LDH在低温下反而不如室温稳定。标本分离后放置太久,其水分容易蒸发,使标本浓缩而结果偏高。因此标本应尽快分析,对于暂时不能分析的标本应该先密封然后保存于4℃冰箱中。
标本状态对生化检验结果的影响
溶血 溶血是临床生化检验中最常见的一种影响因素,它能引起很多指标明显异常。引起标本溶血的原因有很多:注射器或容器内不干净;抽血时使用的针头过小、抽血用力过大、较长时间地使用止血带、产生过多的泡沫;抽血后未取下针头直接将血液注入容器内、混匀抗凝剂时用力过大等。因此有研究者主张抽血时不束扎止血带,因扎带可造成局部淤血、缺氧、水肿、溶血等而影响检验结果,若确需扎带,则不宜过紧,且不能超过1分钟。溶血的干扰机理有以下三种:一是血细胞中高浓度组分逸出,使测定结果增高,血细胞内浓度比血浆中浓度明显高的物质有LDH、ACP、AST、K+,只要轻微溶血就可以对这些项目产生很大影响。另外若某些物质的血细胞内浓度低于血清浓度时,则溶血相当于血清被稀释,因而使这些血清成分特别是发生重度溶血时的检测值降低,这类项目主要有Ca2+、Na+、Cl-、UA等。二是血细胞成分进入血清中后因化学反应而引起其他物质的浓度改变,如溶血后红细胞的磷脂进入血清被血清中的磷酸酯酶水解,其结果造成血清无机磷浓度显著增高。三是血红蛋白本身颜色对检测的光学干扰,血红蛋白的'颜色在431nm和555nm波长附近能使比色、比浊法的吸光度增高,如溶血引起重氮单试剂法胆红素测定结果明显升高。实际上,以上三类干扰在溶血标本中同时存在并可相互作用,因而使受影响的检项更为复杂,这在超微量、高精度和多指标的检测分析中显然不可忽视,因此,严控标本溶血是保证检验质量的重要方面。
脂血 血液脂浊可散射光线,所以对吸光度一般产生正向干扰,导致某些项目如ALB、UA、总蛋白(TP)等测定结果偏高,此时即使使用两点法或连续监测法也不能排除脂血干扰。而在pH10以上的环境中,乳糜中的TG会皂化可使血清逐渐变清,使许多比色法测定如Ca2+、Cr、ALP、TP等结果产生负误差,此时可以用双波长法或设计样本空白消除干扰。在某些实验室用乙醚处理脂血以消除脂浊对生化检验结果的影响,但是乙醚处理的脂浊标本虽然可以排除脂浊对ALT、AST、TP等指标的干扰,但是不能排除对ALB、GGT、LDH、BUN、GLU、Ca2+等指标的干扰。
黄疸 胆红素对反应结果产生黄色化合物的比色分析影响很大,一般可以用样本空白或两点比色法、连续监测法来消除胆红素对黄色结果的影响,但由于胆红素不稳定,随着胆红素被氧化为胆绿素、胆褐素而变色,此时如果使用两点法、连续监测法同样也不能排除胆红素对结果的干扰。此外胆红素作为一种还原剂对氧化反应有干扰,如氧化酶法测定GLU、TG、UA、胆固醇等,因为胆红素可以与上述过程中H2O2分解产生的新生态氧发生反应,从而使新生态氧与氧化酶法反应中的色源物质结合减少,导致结果偏低。此时也可用双波长法或设计样本空白消除干扰,亦或当外观检查发现是黄疸血清时可先除蛋白,然后加胆红素氧化酶预先将胆红素氧化成较稳定的氧化产物胆褐素,可大大减低甚至消除胆红素的干扰。
综上所述,影响生化检验结果的标本因素确实很多,亦很复杂,因此分析前的标本质量问题不能忽视。检验人员除了应该不断的加强专业学习外,还应该多向临床各科室宣传和讲解分析前标本的质量控制对保证检验结果的重要性。临床医疗人员也应该了解标本因素对检验结果的影响,在分析病情时应排除这些影响因素。临床科室与检验科携手合作,共同把好分析前的质量关,保证检验结果的准确性,为临床提供可靠的诊疗依据。
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