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临床生化检验中常见问题汇总
你知道什么是临床生化检验吗?你对临床生化检验了解吗?下面是yjbys小编为大家带来的关于临床生化检验中常见问题的知识，欢迎阅读。
一、导致生化项目校准结果不良的因素
1、仪器方面
(1)光源灯老化导致仪器发光不稳定造成酶类试验项目重复性不良;
(2)孵育系统脏污产生的随机误差;
(3)比色杯脏污、划痕引起外来干扰;
(4)试剂针、样品针及其密封垫老化造成加样不准引起校准结果不良;
(5)清洗机构滴水或堵塞造成交叉污染引起结果不良。
2、试剂方面
(1)试剂劣化引起试剂空白吸光度值变化而造成试剂反应效能不良;
(2)校准品失效引起校准结果灵敏度丧失—标示值和实际值之间的.吸光度存在差距。
3、参数方面
参数设置不合理或者错误。
二、生化项目测试结果不良的具体情况分析
当出现测试结果不良的情况时，首先要分析是所有项目结果不良还是个别项目结果不良;结果不良的项目是否存在规律性;是采用速率法还是终点法分析的项目;是采用单试剂的还是双试剂的项目。然后再做针对性的进一步分析:
1、由光路因素造成的'结果不良。
现象：速率法酶类项目(主波长340nm)结果混乱。
原因分析：(1)灯泡老化;(2)反应槽脏污;(3)水质太差;(4)比色杯脏污;(5)比色杯破损;(6)光窗脱落渗水。
2、由加样系统故障造成的结果不良。
现象：结果偏低或高，或为零，或为负值。
原因分析：(1)样品针(试剂针)脏污堵塞;(2)水平相对位置有偏移导致加样不准;(3)注射器密封性不良有气泡;(4)管路漏气;(5)脱气部分不良;(6)样品针高度不合适会引起SAMPLESH0T的报警;(7)样品针高度不够，采集不到样品，引起项目结果为零或负值。
3、由试剂因素造成的结果不良。
原因分析：(1)试剂变质失效将会使反应曲线不良;(2)试剂间存在交叉污染也会造成测试结果不良;(3)此外，还要检查在更换试剂后，测光点、反应方向、上下界线等参数的设置是否正确。
4、由搅拌棒造成的结果不良。
原因分析：(1)如果单试剂的项目结果不良，搅拌棒1可能有问题;(2)如果双试剂的项目结果不良，搅拌棒1和2都可能有问题;(3)当搅拌棒位置偏移或旋转不良，导致反应不充分，也会造成结果不良。
5、由清洗机构造成的结果不良。
原因分析：(1)管路真空不良致使废液吸不干净造成结果不良;(2)管路堵塞后造成管路滴水、溢水也会导致结果混乱。
三、全自动生化仪双试剂项目中出现R1、R2液不能匹配的原因分析
双试剂项目一段时间做下来后，试剂盒中就会出现R1与R2不能匹配情况，原因是加试剂时试剂针都有附加余量，而且随加的试剂量不同，附加余量也不同;以日立仪器为例，在日立生化仪(如7060)操作手册上有个关于“为防止试剂被稀释，在每次吸取试剂时再吸取一定的余量加在设定量上”的表格如下:
|
试剂设定量（μl) |
50 |
100 |
150 |
200 |
250 |
300 |
350 |
|
附加余量（μl) |
13 |
16 |
19 |
23 |
26 |
29 |
32 |
举个例子,做ALT项目,反应试剂参数,R2为50μl,R1为200μl,R2:R1=1:4
日立7060生化仪实际做时R2要吸掉63μl,R1吸掉223μl,R2:R1=1:3.54，这个吸样比例与实际需要的比例(试剂盒标示的`比例)失衡!时间一久，就会造成R2已经用完而R1还剩余很多的情况。
四、生化检测过程中引起交叉污染的原因分类
交叉污染是生化仪使用中常见的`现象，简单理解为在A项目测定中所使用的试剂、样本、反应产物、清洗剂等对B项目的测定产生了不良影响的现象，A项目和B项目不一定是相邻项目。
交叉污染具体类型可分为：(1)样本针携带污染;(2)试剂针携带污染;(3)搅拌棒携带污染;(4)清洗系统携带污染;(5)比色杯污染。
五、特别针对CKMB/CK升高或倒置的原因简析
在临床实验中偶尔会遇到个别临床标本其CKMB的检测结果与CK的结果不相符，CK的结果在正常范围，而CKMB的检测结果却明显偏高，甚至出现CKMB的结果大于CK的现象，分析原因如下：
1、试剂因素，主要表现为试剂污染或使用已过有效期的'试剂。
2、仪器因素，市面上CKMB的校准品或质控品较少见，而且其价格也较其他酶类校准品高得多。因此，一般医院都未使用CKMB校准品和质控品，而是采用厂家试剂盒使用说明书提供的理论因素，在理论因素设置时，不同仪器略有差异。
3、方法学因素，肌酸激酶CK是由B、M两种不同亚基组成的二聚体，所以CK有三种同工酶即CKMM、CKMB、CKBB。CKBB主要存在于脑组织、胃肠道及子宫平滑肌中，脑组织中几乎全为CKBB，CKMB主要存在于心肌组织中，CKMM主要存在于骨骼肌组织中。在正常人血清中几乎无CKBB或极微量。理论上CKMB的活性是不可能大于CK活性的。
目前常用的检测CKMB的方法是免疫抑制法，出现CKMB>CK的情况就是可能由这种方法的检测原理造成的。在人体中正常情况下CKBB很少，可忽略，而免疫抑制法就是建立在忽略CKBB的基础上的。即用抗CKM单体的抗体将M亚基完全抑制，所以CKMM会失去活性，而CKMB活性会失去一半，这样测出的活性实际就是CKMB的一半，所以CKMB的活性应该为测定的2倍。但如果存在CKBB就会使结果偏高，即测定的CKMB活性= CKMB+2CKBB。如果CKBB>CKMM，由于结果要乘2，也就是说2CKBB+CKMB>CKBB+CKMB+CKMM，即测得的CKMB活性>CK活性。
4、溶血因素，因红细胞内含有大量的腺苷酸激酶(AK)从而催化ADP反应生成ATP而引起NADPH的吸光度的改变，使CK和CKMB测定结果假性偏高。CKMB是CK-B×2，假性偏高较CKMM更明显，同时CKMB参考范围较小，可能出现CKMB大于CK或CK结果在正常范围内，而CKMB结果却明显偏高。
5、随机误差，如吸到小气泡等。
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