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严重脂血标本时生化项目的检测该如何处理
脂血标本是临床检验常见的干扰原因。血脂中的CM和VLDL是悬浮颗粒,对生化检测常用的比色法或比浊法有极大干扰。对于重度脂血样本,由于样本的本底吸光度过高,必须对样本进行预处理。下面是yjbys小编为大家带来的关于严重脂血标本时生化项目的检测该如何处理的知识,欢迎阅读。
严重脂血标本时生化项目的检测该如何处理
1、生理盐水稀释法:大部分全自动生化分析仪都具有自动稀释、自动换算功能;也可以先手工稀释,再将测定结果乘以稀释倍数。这种方法可以在一定程度上降低样本空白而提高测定的准确性,但是该法并不能完全消除脂浊对测定结果的影响,特别是要注意样本稀释后由于基质效应而导致测定结果出现一定的误差。
2、乙醚抽提法:在高脂血样本中加入有机溶剂乙醚,震荡混匀后离心,可有效地将样本中的甘油三酯等脂溶物质萃取出来。但是由于该方法加入了新的化学物质,会对有些检验项目的测定产生影响。
3、沉淀分离法:该方法来源于沉淀法测定HDL,即联合使用磷钨酸-镁沉淀剂和聚乙二醇-硫酸葡聚糖沉淀剂,沉淀血清中的乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白(a),该方法对部分检验项目的测定会产生影响,且操作繁琐,因此该法也有一定的局限性。
4、干化学法:干化学分析仪是采用以Kubleka-Munk理论为主要理论基础的多层薄膜的固相试剂技术,将发生在液相反应物中的反应,转移到一个固相载体上,利用反射光度法和基于离子选择电极(ISE)的差示电位法进行检测的一类新型仪器。当全血通过多层薄膜的固相时,血细胞、脂浊微粒等物质可以被阻截,因此该法亦可有效地去除脂浊对生化检验结果的干扰。
5、高速离心法:将脂浊血清加盖密封,经高速离心后,血清可以分成两层,吸取下层的血清进行临床生化测定,适用大部分临床生化测定指标的测定。但该法设备要求较高,中小医疗机构没有高速离心机,限制了该法的使用。
一般情况下都不做特殊处理,进行正常检测,但在报告中会注明:严重脂血及结果仅供参考,建议复查。ALT、AST、UREA少数项目无法测出结果;TP、CREA结果偏低;TBIL、DBIL结果偏高,必要时可以对样本进行稀释,但对结果会有影响。
脂血标本是临床常见的干扰原因,对比浊法和比色法的生化项目可以造成较大干扰。对不同的检测项目可以采用不同的处理方法来消除干扰。
1)常用的化学方法有乙醚提取法,经过乙醚处理的脂血标本虽然可以排除脂浊对于ALT、AST、TP、TBIL、DBIL、HBDH、CK-MB、Crea等指标的干扰,但是不能排除对ALB、GGT、LDH、BUN、GLU、CA等指标的干扰。生理盐水稀释法,是最常用的方法。还有沉淀分离法等。以上方法都需要注意基质效应的影响。
2)常用的物理学方法是高速离心法,高速离心法易于推广,注意可能会得到溶血标本。
3)干化学法较好,可以有效排除脂血的影响。
遇严重脂血标本时,TG机外稀释,其它生化项目检测时我们用高速冷冻离心机,1-1.5万转/分处理,效果不错。
严重脂血的标本,实验室有条件应该进行超速离心分离后在检测;也可以进行稀释后再测,同时需要考虑稀释后浓度过低超出检测下限问题。
如方便,询问患者是否进食后采血,因为吃饭后尤其是摄入过多脂质食物时,大量的乳糜微粒会进入血液中形成脂血,干扰很多生化检测项目的测定。如果是体检或是慢性疾病患者建议严格空腹8小时后采血,如果是空腹采血患者或是急诊患者,应根据生化检测项目进行相应的去血脂处理,如超速离心法、血脂清除剂等。在不具备清除血脂条件的基层实验室,脂血标本测试完应标注标本类型为脂血标本,并告知临床科室原因。
脂血标本的处理
在生化检测中,脂血可对 ALT、AST、GGT、ALP 等项目形成干扰。若因为给予肠外营养支持治疗而出现的脂血标本,会干扰患者正常检测结果,脂血对血常规的影响主要是可通过影响 Hb 的比色测定导致 Hb 假性增高,MCH 及 MCHC 也随之增高。此外,脂血标本对凝血结果也会产生影响。 由于脂血还会影响血红蛋白分析,所以危害性更甚于溶血,所以当遇到有脂血时,我们会退回标本,并建议患者隔天空腹检查。若是没法退回标本并隔天空腹检查的,我们要做好处理。
1、使用超速离心机离心
美国临床和实验室标准协会( CLSI )推荐使用超速离心处理血脂样本。常规离心后的血清加盖密封,使用超速离心机,促使乳糜微粒层分离出,然后吸下层清液再进行检测。超速离心机转速要大于六万转,如果不具备条件,可以使用高速离心机,但要根据情况多离心几遍。但是需要注意甘油三酯和胆固醇不建议使用高速离心后的血清进行检测,离心后检测结果会低于离心前,尤其是甘油三酯下降明显。
2、血清(血浆)稀释法
血清(血浆)稀释适用于使用血清(血浆)进行检测的项目,就是将血清(血浆)标本加入多倍的生理盐水,降低血清中脂蛋白含量,达到检测目的,但是这种方法受到仪器分析能力的限制,而且当稀释倍数过大时还会造成稀释误差,都会造成结果不准。
3血浆置换法
血浆置换适用于脂血的血常规标本检测,就是将血常规标本低速离心后,分离混浊血浆,弃去浑浊血浆后,加入等量生理盐水置换,如此反复 3 ~ 4 次以上,再进行检测。
4、公式计算法
这种方法针对于血常规检测时血浆置换耗时费力, HGB 校正值= HGB 校正前 - HGB 脂血血浆×(1- HCT 校正前)
注:HGB 校正前是指脂血标本上机检测血常规时得到的 HGB 值, HGB 脂血血浆是指将血常规标本离心后吸取浑浊血浆单独进行全血细胞检测时得到的 HGB 值, HCT 校正前是指脂血标本上机检测血常规时得到的 HCT 值。相关研究表明,脂血血常规检测时,与血浆置换相比,公式计算法简单快速,适合急诊标本。
以上这些方法都有着一定的局限性,比如说,甘油三酯和胆固醇离心后会降低,凝血中方法学是时间法的不可以使用稀释法,血浆置换法很耗费时间等等,所以需要我们根据临床、项目等多方面考虑适用方法,尽可能消除脂血对于检测的印象,出具准确的检验报告。