凝血检测的误差来源

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凝血检测的误差来源

　　存在凝血紊乱的病人可能出血或可能栓塞。凝血涉及凝血因子和血小板的激活。评估血小板事件，可通过包括CBC计数，外周血涂片的检查，出血时间的检查和血小板聚集测试。评估凝血因子典型地靠PT和APTT来看，异常的PT或aPTT可通过使用纠正实验来确定由于因子缺乏还是抑制物引起的。如果延长的时间在纠正实验中得到纠正，则进行因子检测识别哪个因子缺乏。抑制物则包括某些特定因子的抑制物和狼疮抗凝物，所以未得到纠正的应筛查一下。一般凝血检查均采用枸椽酸钠抗凝管。下面是yjbys小编为大家带来的关于凝血检测的误差来源的知识，欢迎阅读。

　　凝血检测的误差来源

　　1. PT和APTT检测的误差一般因子仅是轻微减少，不会影响导致凝血时间延长，只有比正常范围减少20%-40%时，才可能导致凝血时间延长。光学法的PT和APTT可能受高脂血，黄疸血影响而时间缩短。未适当离心的血浆可能存在PF4，当使用APTT监测肝素时，PF4可与肝素结合，导致假性APTT缩短。同时 FVIII是急性时相反应蛋白，如果病人在急性炎症期，可能FVIII急剧升高，导致APTT假性缩短。

　　2. 凝血酶时间TT检测的误差凝血酶时间即测量纤维蛋白原转化形成(交联)纤维蛋白的时间。纤维蛋白血症，FDP 水平升高，和异常蛋白可干扰纤维蛋白的交联从而导致假性TT延长。淀粉样变性可抑制纤维蛋白原转化成纤维蛋白，也可导致TT延长。在一些严重疾病，如存在肝素类抗凝物可导致TT延长。

　　下面会详细介绍实验室中凝血特定检测的常见干扰因素。1. 抗凝比例不对枸椽酸抗凝管血液与抗凝剂比例为9:1的比例。充盈不足或过度可导致凝血时间检测的异常。

　　当HCT大于 55% 或小于21%时候，需要用以下公式修正: C= 0.00185 X(100 H)X VC 是3.2%枸椽酸钠的量，以mL计,H 是HCT的值

　　V 是血量，以mL计

　　2. 稀释或抗凝剂的污染从留置管或导管中收集的血样本可能存在检测干扰。样本被冲洗管路或溶血可影响凝血检测结果。如必须要从内置导管中收集血液，要避免从肝素化导管采集。如果必须从肝素化的导管收集，采集前确保要足够的冲洗。NCCLS 标准建议使用 5mL 生理盐水进行冲洗。收集前需至少使用 5mL 或 6 倍的导管的死腔量排出丢弃。血管护理标准和实践指南关于死腔量的使用推荐遵从制造商的说明书。此指南同时描述了血液不应从各种不同类型的内置导管收集，静脉注射装置，和内置的心血管或脐带中收集。即使新人死腔量的的规定，样本从肝素化的导管中采集容易被肝素污染。从而，最好从外周血中采集，避免肝素，水蛭素，或阿加曲班注射治疗用的手臂侧采集。在凝血检测前，肝素可被使用的聚凝胺中和或去除;然而，残留的肝素可能干扰到检测。通过增强抗凝血酶活性，肝素抑制活化的 FII，FX，FIX，FXI，FXII 和激肽 K。相比，重组水蛭素，达那肝素，和阿加曲班仅抑制活化的 FII。这些抗凝剂(肝素，重组水蛭素，和阿加曲班)可导致 APTT 延长，并干扰凝血检测如因子检测和狼疮抗凝物检测。因子检测可产生假性减低，而狼疮抗凝物可产生假阳性。

　　3. 创伤性失血创伤性失血可导致人为的凝血检测 PT 和 APTT 的缩短。这是因为内皮细胞释放组织因子后过度的激活凝血因子和血小板。正确的采集技术可避免此操作的组织因子混入从而避免此人为的干扰。

　　4. 类风湿因子 RF纤溶过程是由纤溶酶介导，并降解纤维蛋白凝块成为 D-二聚体和 FDP 的过程。纤溶同时也降解完整的纤维蛋白原，产生 FDP。纤维蛋白降解产物和纤维蛋白原降解产物称为 FDPs 或 FSPs.检测 D-二聚体和 FDP 使用的是半定量或定量的免疫法。乳胶凝集法:病人血浆与包被了抗-FDP 抗体的乳胶颗粒混合。如果存在 FDP，则会与乳胶颗粒中的 FDP 抗体结合。结合后聚集物可被观察到。不同稀释度的病人血浆可以被半定量方法测量则为 FDP 滴度。乳胶凝集检测同样可用于 D-二聚体，不仅是技术员的肉眼观察，也可以凝血分析仪上测量浊度。ELISA 方法:定量的 ELISA 检测可用于 FDP 和 D-二聚体。传统 ELISA 检测方法较精确，但因为分析时间较长不常用。现在也有自动化的 ELISA 检测(VIDAS, bioMérieux, Durham, NC).D-dimer and FDP 检测一个重要的干扰是 RF 的干扰。可导致假阳性结果。如果 PT, aPTT, TT, and fibrinogen 均正常，而 D-dimer and FDP 检测升高很可能即出现此干扰。

　　5. 脂血，溶血或血小板减少样本的血小板聚集检测血小板聚集测量血小板的相互粘附形成止血团块的能力，是一期止血的关键成分。可以用富血小板血浆或全血进行。胶原，瑞斯托霉素，花生四烯酸，二磷酸腺苷，肾上腺素，和凝血酶可以刺激血小板因而诱导聚集。对激动剂的响应可提供对血小板功能紊乱的类型。测量聚集的响应一般是基于样本的透光性改变而测量血小板聚集可受一些因素的影响。脂血和溶血标本可使聚集检测困难，由于其使聚集的透光改变减少。血小板减少也可使聚集评估很难，由于低血小板计数本身可产生异常聚集类型。

　　6. 抗凝物或狼疮抗凝物检测的干扰ISTH 狼疮抗凝物分支委员会推荐用两个敏感的针对狼疮抗凝物的检测以评估不同凝血途径的成分。这是基于凝血时间的 dRVVT，和基于 APTT 的白陶土凝血检测，和稀释凝血酶原时间(组织因子通路抑制测试)。狼疮抗凝物可使磷脂依赖的凝血检测的时间延长。因为其结合磷脂因此干扰磷酯在凝血瀑布学说中的作用。狼疮抗凝物筛查通过使用一个低浓度的磷脂以增强敏感性，任何异常筛查实验结果(延长)一般需要 1:1 混合实验以显示凝血时间依然延长。确认实验一般是加入过量的磷脂，凝血时间则显示缩短至正常趋势。血小板中和实验(PNP)是一个确认检测，冷冻-融解的血小板提供过量的磷脂。六边相的磷脂中和实验也同样基于相同的原理—即，凝血时间可能不被纠正，在磷脂的六相期时。需要关注的是 APTT 可能会或不会延长，基于试用中磷脂的量多少。在很多的抗凝物检测中，肝素(包括皮下注射低剂量肝素)可以引起假阳性狼疮抗凝物检测结果。肝素抑制活性 FII，X，IX，XI，XII 和激酶 K。因此，凝血时间如 PT 和 APTT 延长，同时可被狼疮抗凝物干扰。重组水蛭素，达那肝素，阿加曲班抑制活化的 II 因子和同时使凝血时间延长。在凝血检测开始前，可去除肝素或用聚凝胺中和;然而残留的肝素可继续造成检测的干扰。在香豆素类抗凝的样本不影响狼疮抗凝物检测结果

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