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临床医学检验技士备考资料:溶血反应的检测试剂
为贯彻国家人事部、卫生部《关于加强卫生专业技术职务评聘工作的通知》等相关文件的精神,自2001年全国卫生专业初、中级技术资格以考代评工作正式实施。通过考试取得的资格代表了相应级别技术职务要求的水平与能力,作为单位聘任相应技术职务的必要依据。下面是小编整理的临床医学检验技士备考资料:溶血反应的检测试剂,欢迎阅读!
溶血反应的检测试剂
(一)补体
检测血清补体水平或补体活性时需要从受检者采血及分离血清。做补体结合试验时多采用豚鼠血清作为实验用补体的来源。因为补体在体外极易衰变,所以检测补体活性的血清标本和作为补体试剂的血清必须新鲜。
受检者一般做静脉采血,在动物可做心脏采血。血清分离后应及时使用,最好在当日用完。必须保存时采用小量分装的办法,置-70℃下可保存数月,避免反复冻融。冻干制品可长期保存,但其活性都不同程度地比新鲜血清降低。
以豚鼠血清作补体来源时,应考虑到个体差异。为了确保血清中补体的有效活性,必须取3只以上豚鼠的血清混合后使用。
(二)绵羊红细胞
从绵羊颈静脉无菌采血,抽出血液后立即小心地注入放有玻璃珠的无菌干燥三角烧瓶中,充分旋摇15~20min,以除去纤维蛋白。也可将羊血与等量或2倍量的Alsever血液保存液混合,既有抗凝作用,又适于储存;分装后置4℃,可使用3周。
实验前,取适量抗凝血,加入8~10倍的生理盐水,轻轻混匀后2000r/min离心5min;弃上清,沉淀的红细胞用生理盐水再洗一次,这时上清为无色澄清,如显红色说明有溶血现象,应更换新鲜羊血;第三次用缓冲液洗涤,弃上清,取压积红细胞用缓冲液配制SRBC悬液,使用浓度一般为2%~5%。为使红细胞浓度标准化,可吸取少量红细胞悬液,中入20~30倍的稀释液中,在542nm波长比浊,以吸光度为标准调整红细胞浓度。
(三)溶血素
溶血素即抗绵羊红细胞抗体,多是以绵羊红细胞免疫家兔而得到兔抗血清。一般没有必要进一步提纯抗体,但在试验前需先进行加热56℃30min或60℃3min以灭活补体。
由于补体溶血试验及补体结合试验均是比较精密的试验,其结果与溶血素的效价有关,所以试验需要滴定溶血素效价;在制备抗血清的过程中,于动物采血前和分离抗血清后也需要滴定溶血素效价。
1.溶血素稀释稀释溶血素时,要先对效价有个大概的估计,以便确定稀释度的范围。动物采血前滴定时稀释范围要稍大些,实验前的滴定便以原先的记录作为参考(溶血素的效价多在数千单位以上)。溶血素稀释一般不采用连续倍比稀释法,因为稀释到最后时跨度太大,不容易确定单位。为了便于操作,现举例按表14-1配制不同稀释度的溶血素。
2.效价滴定将稀释好的溶血素及其他试剂按表14-2所示逐步加入到各试管中,放置37℃水浴,不要盖上水浴箱的盖子,以免盖子上冷凝的水蒸气滴入试管内引起非补体性溶血。30min后取出观察结果。
温育反应后,完全溶血的试管内液体红色透明,放置一段时间后管底无细胞沉淀,离心后可见少许细胞碎渣。不溶血的管内液体浑浊;放置后可见红细胞沉淀,上清无色透明。不同程度的不完全溶血介于两者的中间变化态。
按照以上标准,以产生完全溶血的最高稀释管为最大有效反应管,以该管的溶血素稀释倍数为溶血素产效价。例如表14-2中的溶血素效价应为1:4000;在1:4000稀释的情况下,反应液中所含溶血素的的量为1U/ml。
做补体活性测定或补体结合试验时,一般使用2U/ml溶血素(在本例做1:2000稀释),与SRBC悬液等体积混合。
(四)稀释缓冲液
磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验,pH值应调至7.2~7.4之间。另加入适量氯化钠以保持等渗,并适当地加入一些钙离子和镁离子,这是补体活化所不可缺少的。有的配方还加入0.1%的明胶以使蛋白溶液稳定;加入0.01%NaN3可以防腐,利于较长时间保存。
基础知识篇
1.属于血液中正常有形成分的是血小板
2.不属于临床血液学研究内容的是淋巴细胞的分化和发育
3.正常人血液 PH 应该在7.35~7.45
4.血浆渗透压量正常人约为290~310mOsm/( kg ·H20)
5.血液的主要生理功能包括:运输、协调、防御、维持机体内环境稳定等功能
6.在必要时,成人静脉采血的部位可选择股静脉
7.皮肤采血的特点是耳垂采血检查结果不够恒定
8.真空采血法又称为负压采血法
9.属于酸性染料的是伊红
10.关于细胞成分化学特性,叙述正确的是血红蛋白为碱性蛋白质
11.晚幼红细胞脱核成网织红细胞的过程是完成在骨髓
12.关于红细胞生理,描述正确的是红细胞有交换和携带气体的功能
13.毎克血红蛋白可携带氧气为1.34ml
14.新生儿红细胞计数的参考值(6.0~7.0) X 1012几 L
15.红细胞 Hayem 稀释液中硫酸钠的主要作用是提高比密防止细胞粘连
16.枸橼酸钠在枸橼酸钠稀释液中的主要作用是抗凝和维持渗透压
17.1966年被 ICSH 推荐的血红蛋白检测参考方法是 HiCN
18.改良牛鲍计数板两侧支柱加盖专用盖玻片形成的计数池高为0.10mm
19.HiCN测定最大吸收峰位于540nm
20.HiN3检测的最大吸收峰位于542nm
21.正常情况下,外周血中的血红蛋白主要是氧合血红蛋白
22.瑞氏染色血涂片中,正常红细胞直径范围在6.0~9.5um
23.大4细胞是指4细胞自>10um
24.关于嗜多色性红细胞叙述正确的是胞质内尚存少量嗜碱性物质
25.血细胞比容测定 ICSH 确定的参考方法是放射性核素法
26.温氏法测定血细胞比容其结果应读取红细胞柱还原红细胞层
27.对血细胞比容叙述正确的是作为 MCV 计算的基础数据
28.对红细胞平均指数叙述正确的是 MCHC 的计算单位是 gL
29.RDW反映红细胞的体积大小的异质性
30.对红细胞体积分布宽度叙述正确的是 RDW 可作为 IDA 的筛选诊断指标
31.标本中可影响 RDW 的因素是红细胞碎片
32.有关网织红细胞检测原理叙述错误的是经普鲁士蓝染色后可见连成线状的网状结4
33.ICSH推荐的血沉检测的标准方法为魏氏法
34.魏氏法检测血沉所采用的数值报告单位是 mm / h
35.在机体防御和抵抗病原菌过程中起主要作用的外周血中的细胞是中性粒细胞
36.正常状态下衰老的中性粒细胞主要被破坏所在的系统是单核﹣吞噬细胞系统
37.在白细胞成熟过程中,最早出现特异性颗粒的细胞是中幼粒细胞
38.与白细胞无关的是 Howell - Jolly 小体
39.正常生理情况下,关于白细胞变化规律的正确叙述是早晨较低,下午较高
40.正常情况下,血涂片经染色后中性粒细胞核象最多见的是三叶核
41.从原始粒细胞、早幼粒细胞到中幼粒细胞均有合成 DNA 的能力,这类粒细胞应属于分裂池
42.血液分析仪叙述正确的是仪器法对白细胞的分类不能替代显微镜分类
43.在电阻抗法中,与脉冲大小呈正相关的是细胞体积
44.目前血型的定义是指抗原抗体系统的遗传特性
45.ISBT将红细胞表面抗原按血型系统分为23个
46.红细胞膜上的 ABH 抗原主要构成物质是糖蛋白和糖脂
47.酶介质法作血型鉴定时,用蛋白酶处理红细胞,主要是破坏红细胞表面的唾液酸,使红细胞表面负电荷减少
48.原尿中不存在的物质是红细胞
49.原尿中的葡萄糖被完全重吸收的场所是近曲小管
50.原尿中肌酐几乎不被重吸收而随尿排出体外
51.肾单位不包括集合管
52.少尿是指24h尿量少于400ml
53.成年人正常尿量为1000~2000ml/24h
54.镜下脓尿为每高倍视野尿白细胞>5个
55.小圆上皮细胞主要是指底层称移行上皮细胞
56.属于尿中异型红细胞形态的是环形红细胞
57.试带法检测尿液 PH 所用的指示剂是甲基红和溴麝香草酚
58.本周蛋白尿属于溢出性蛋白尿
59.蛋白尿是指尿液中蛋白质超过0.10g/ L
60.导致肾前性蛋白尿的疾病是挤压综合征
61.肾小管性蛋白尿见于器官移植
62.尿糖定性为阳性,血糖浓度超过8.88mmol/ L
63.酮体主要是机体内脂肪的中间代谢产物
64.关于尿2-M的叙述错误的是2-M为肾小球性蛋白尿
65.反映肾小管功能损害最敏感的酶是尿 N ﹣乙酰﹣ B - D ﹣氨基葡萄糖苷酶
66.非孕妇尿中 HCG 的浓度<2.0ng/ L
67.尿液分析仪的组成包括机械、光学、电路系统
68.普通膳食情况下,脂肪约占粪便干重的10%~20%
69.脂肪泻是指正常成人24h粪便中的脂肪总量超过 g
70.细菌约占粪便干重的1/3
71.成人粪便中的主要菌群是大肠埃希菌、肠球菌、厌氧菌,约占80%
72.粪便中球菌和杆菌的比例约为1:10
73.霍乱、副霍乱时粪便性状是米泔样便
74.会造成大便隐血试验假阴性的是服用大量维生素 C
75.阿米巴痢疾及过敏性肠炎的粪便中可见夏科﹣雷登结晶
76.胆道梗阻时,粪便呈现白陶土色是由于没有粪胆素
77.前列腺液约占精液的30%
78.角化前细胞属于表层细胞
79.癌细胞多形性和癌珠是高分化鳞癌的标志
80.腺癌是由柱状上皮细胞恶变而来的癌
81.恶性肿瘤脱落细胞分化程度越高细胞形态畸形越明显
82.恶性肿瘤脱落细胞分化程度越低胞质量越少
83.属于嗜酸性物质的是嗜酸性颗粒
84.属于嗜碱性物质的是细胞核蛋白
85.既含酸性物质,又含碱性物质的是中幼红细胞
86.成年人外周血淋巴细胞绝对值是(0.8~4)X109/L
87.新生儿外周血白细胞总数的参考值范围是(15~20) X 109/L
88.体外保存制品一般条件下,半衰期最短的是纯化因子 VIII
89.白细胞制品输注后易产生免疫反应
90.烧伤患者需大量输注的制品是白蛋白制品
91.表层移行上皮细胞又称为尾形上皮细胞
92.来自肾小管的上皮细胞是复粒细胞
93.尿液中主要以清蛋白为主见于肾小球性蛋白尿
94.尿液中主要以本周蛋白为主见于溢出性蛋白尿
95.尿液中主要以α1-M和β2-M蛋白为主见于肾小管性蛋白尿
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