实验诊断学实验课教学总结

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　　第一章总论

实验诊断学实验课教学总结

　　概念

　　[1] 临床检验：以离体的血液、体液、排泄物等为标本，通过试剂、仪器等进行检测，并对检测的过

　　程进行全面的质量控制，最终得到可靠的检测结果或数据。

　　[2] 实验诊断：通过临床检验得到的信息为预防、诊断、治疗和预后评价所作的临床医学活动。

　　[3] 床边检验：在病人医疗现场进行的临床检验。

　　[4] 参考值或参考范围：参考值是指对抽样的个体进行某项目检测所得的值；参考范围是指所有抽样

　　组测得值的平均值加减其标准差。

　　[5] 质量控制：为保证临床检验结果质量(满足医生/客户要求)而采取的一系列检查、控制手段

　　第二章血液检查Examination of Blood

　　一、血液：不断地流动于人体的循环系统中，直接或间接参与全身各个组织器官的新陈代谢、功能调节及维持人体内、外环境间的平衡，完成各项生理功能活动。

　　二、1. 血液有形成分的组成

　　血细胞占全血40～50%，称之有形成分

　　1.白细胞中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞

　　2.红细胞 (主要成分是血红蛋白)

　　3.血小板

　　三．血液一般检查General Examination of Blood(血常规)

　　1、一些缩写

　　Erythrocyte count (RBC) 红细胞计数

　　Hemoglobin determination (Hb) 血红蛋白测定

　　Leukocyte count (WBC) 白细胞计数

　　Differential leukocyte count白细胞分类

　　Platelet count ( PLT) 血小板计数

　　新生儿特点:红、白细胞都比成人高，红细胞呈―生理性巨幼红细胞贫血‖的表现，白细胞呈感染的表现（粒细胞增高并左移）

　　2、红细胞计数 Erythrocyte Count

　　方法:显微镜计数法；全自动血细胞分析仪计数法

　　操作:用等渗稀释液将血液作 200 倍稀释，滴入血细胞计数板中静止 1-2 min，于高倍镜下计数 5 个中方格红细胞总数，经换算即得每升血液中血红细胞数。

　　公式:RBC/L= 5个中方格总数×5×10′200×106

　　报告格式: Δ.ΔΔ×1012/L 3.81×1012 /L

　　参考值

　　（男）4.0～5.5×1012/L

　　（女）3.5～5.0×1012/L

　　（新生儿）6.0～7.0×1012/L

　　各种红细胞的形态

　　3．相关检测

　　[1]．平均红细胞容积(MCV):MCV=红细胞比容/红细胞数

　　红细胞数参考值: 80-94fl

　　[2]．红细胞比容测定（Hct):抗凝全血经离心沉淀后，测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值。参考值男性42-49%女性 37-48%

　　[3]．平均红细胞血红蛋白量（MCH)：指平均每个红细胞内所含血红蛋白的量。

　　[4]．平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC)：指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度

　　参考值: 310-350g/LMCHC=血红蛋白(g/L)/ 红细胞比容(%)×100g/L

　　[5]．红细胞容积分布宽度 (RDW):RDW=S.D./ 平均红细胞体积

　　平均红细胞体积参考值:11.5-14.5%

　　RDW 的统计学实质是红细胞大小的变异系数 CV RDW<14%

　　类型 MCV MCHMCHC 临床类型

　　大细胞贫血 >100 >32 310-350 巨幼细胞贫血

　　正常细胞贫血 80-9426-32310-350 AA急性失血性贫血，溶血性贫血，骨髓病性贫血单纯小细胞贫血<80 <26 310-350 慢性炎症性贫血肾性贫血

　　小细胞低色素贫血<80 <26 <300缺铁性贫血，铁粒幼细胞性贫血，珠蛋白生成障碍性

　　贫血，慢性失血性贫血

　　4．临床意义：

　　（红细胞增加）

　　相对性增高：各种原因导致的血浆容量减少，使红细胞相对增多。剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿。

　　绝对性增高：由于缺氧而致红细胞代偿性增多，红细胞增多的程度与缺氧程度成正比

　　生理性：胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈体力劳动、情绪激动时，红细胞可一过性增多

　　病理性：严重慢性心、肺疾患，如阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、紫绀型先天性心脏病，真性红细胞增多症

　　（红细胞减少）

　　生理性：妊娠中、后期，血容量增加约 25 %，引起血液稀释；6个月～2岁的儿童由于生长发育迅速,血容量急剧增加而致造血原料相对不足；老年人造血功能明显减低致红细胞减少；月经期暂时引起下降。病理性：各种类型贫血：如缺铁性贫血、巨幼红细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、继发性贫血等。

　　5．网织红细胞计数及正常参考值：

　　[1]网织红细胞是晚幼红细胞脱核后，在完全成熟之前的过渡型红细胞。由于胞浆中尚存核糖体、核糖核酸等嗜碱物质，用煌焦油兰等染料进行活体染色后，胞浆中可见蓝绿或蓝色的网状结构，故名网织红细胞。成人：0.5%-1.5%新生儿（<3月）：2%-6%

　　[2]网织红细胞计数的意义

　　增多：骨髓增生旺盛。常见于溶血性贫血，尤其是急性溶血性贫血（可达20%以上）、急性大失血。贫血治疗有效。如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血，经相应治疗后1-2日即开始，1周左右达最高峰

　　减少：骨髓增生低下，如再生障碍性贫血、溶血性贫血有再生障碍危象时

　　6．白细胞测定

　　[1]白细胞计数Leukocyte Count

　　方法：显微镜计数法、全自动血细胞分析仪法计数法:以 2% 冰醋酸对血液作定量稀释，同时破坏红细胞。然后将悬液充入细胞计数池内，低倍镜计数 4 个大方格内白细胞总数。计算原则同红细胞。 MCH=血红蛋白(g/l)/ 红细胞百万数/μl 参考值: 26-32pg

　　原理（显微镜计数原理）：用 2 % 乙酸对血液作定量稀释，同时破坏红细胞。混匀并滴入计数室中，低倍显微镜下计数 4 大方格内的白细胞数，经换算得每升血液中白细胞总数。

　　公式：WBC/L = 4 格白细胞总数 4×10×20×106

　　报告格式:Δ.ΔΔ×109/L

　　参考值:成人4.0～10.0 × 109/L;新生儿15.0～20.0 × 109/L

　　临床意义

　　（白细胞增高）

　　生理性增高:见于妊娠期、分娩时、新生儿;剧烈运动、淋浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等; 病理性增高:急性感染如肺炎、扁桃体炎、急性阑尾炎。严重组织损伤、大量细胞破坏。如术后12～76h，WBC常 >10.0×109/L；急性心肌梗死后1～2d，常见WBC明显增高；急性溶血亦见WBC增多，增多成分以中性分叶核粒细胞为主。急性大出血:如脾脏破裂或宫外孕输卵管破裂后，WBC迅速增多常达20.0×109/L。这可能是应激状态、或内出血一过性缺氧。急性中毒:如安眠药、滴滴畏中毒， WBC可高达20×109/L以上，代谢性酸中毒。如糖尿病、酮体症、酸中毒及慢性肾炎尿毒症时，也常见WBC增多，均以中性粒细胞为主。

　　白血病及恶性肿瘤:急、慢性白血病、肝癌、胃癌等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成素，并能吸引骨髓储备池WBC释放。

　　（白细胞减少）

　　某些革兰氏阴性杆菌感染如伤寒、副伤寒杆菌感染时，白细胞总数可低至2.0×109/L；病毒感染。某些血液病如再生障碍性贫血；巨幼红细胞性贫血；恶性网状细胞病（恶组）；急性非白血性白血病。脾功能亢进破坏过多、脾素抑制骨髓生成;慢性理化损伤;电离辐射，如X线、放射性核素等；服氯霉素。自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮。

　　[2]白细胞分类计数与临床意义

　　中性粒细胞（neutrophil）：游走、吞噬 50 ～ 70%

　　嗜酸性粒细胞（eosinophil）：致敏反应0.5 ～ 5%

　　嗜碱性粒细胞（basophil）：释放组织胺、肝素0 ～ 1%单核细胞（monocyte）：吞噬、清除死亡细胞及异物3～ 8%

　　淋巴细胞（lymphocyte）：参与体液、细胞免疫20 ～ 40%

　　中性粒细胞Neutrophil

　　生理特性：渗出性、变形性、趋化性、吞噬性

　　骨髓血液

　　分裂池成熟池储备池边缘池循环池

　　4-5d1-3d 2-3d

　　核左移：原粒早幼粒中幼粒/晚幼粒杆状核/杆状核分叶核/分叶核细胞核左移：周围血中杆状核粒细胞增多甚至出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时均称为核左移

　　杆状核粒细胞增多：6%：轻度左移；10%：中度左移；25%：重度左移或称为类白血病反应

　　类白血病反应：患儿男， 2.5岁，日本籍，于10天前因受冷而发热，自测体温38℃（腋下），无畏寒、头痛、呕吐、腹泻，就诊于当地医院，血常规 WBC 28.9×109/L，阿莫西林0.125g 3/日治疗，无明显好转，4天后患儿面、背及双上肢皮肤反复出现散在红色丘疹，停药否无区别。1999年7月5日急诊住我院。实验室检查，血象：Hb110g/L, WBC 23×109/L,血小板 121×109/L，幼稚型异常淋巴 56%，成熟淋巴 21%，嗜酸性粒细胞2%，中性粒细胞 21%，骨髓穿刺二次，骨髓细胞分类象同血涂片象。

　　细胞核右移：正常人周围血中性粒细胞以三叶核者为主，若五叶者超过5% 时为核右移，此时常伴有白细胞总数减少。一过性地出现核右移是正常现象。如在疾病进行期突然出现核右移的变化，则表示预后不良中性粒细胞临床意义生理性增高:见于妊娠期、分娩时、新生儿期;剧烈运动、热水浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等

　　病理性增高:急性感染;严重组织损伤;急性大出血;急性中毒;白血病及恶性肿瘤

　　病例：患者朱全妹，女性，47岁，因砖墙砸伤腰骶臀部致左下肢活动受限伴腰骶臀部皮肤发紫5天于2001—12—04由急诊收治入院。

　　1．创伤性失血性休克 2．腰骶部、髂后部、右臀后部皮肤严重挫擦伤伴皮下积血 3．骨盆严重骨折 4．会阴部、肛门严重挫裂伤

　　血常规检查结果：Hb：92g/L RBC：3.0×1012/LPLT：271×109/L

　　WBC：32.7×109/L：中幼粒细胞： 2% ;晚幼粒细胞：5%

　　杆状核粒细胞：35% ;多核粒细胞：45% ;淋巴细胞：9% 单核细胞： 4%

　　中性粒细胞减少:某些革兰氏阴性杆菌感染;某些血液病;脾功能亢进;慢性理化损伤;自身免疫性疾病

　　淋巴细胞Lymphocyte

　　病理性增多见于：病毒性感染;某些慢性感染;各类淋巴细胞性白血病

　　淋巴细胞减少见于:接触放射线;应用肾上腺皮质激素及肾移植术后、AIDS

　　单核细胞Monocyte

　　单核细胞病理性增多见于：心内膜炎、疟疾、黑热病;急性感染的恢复期;活动性肺结核及粟粒性结核;慢性单核细胞白血病

　　嗜酸性粒细胞Eosinophil

　　增高见于：过敏性疾病;寄生虫病;皮肤病;慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤

　　7．血小板计数platelet

　　是由骨髓中成熟巨核细胞生成;在止血过程中起着重要的作用

　　计数方法:显微镜计数法;全自动血细胞分析仪法

　　参考值100～300×109/L

　　临床意义

　　血小板增多 > 400×109/L;见于血小板增多症、慢性粒细胞增多症、真性红细胞增多症、骨髓纤维化、脾切除等。

　　血小板减少 < 100×109/L;见于血小板减少紫癜(ITP)、再生障碍性贫血、急性白血病、X射线照射。病例患者：女32岁已婚，有一8岁女儿，无业

　　主述：经常头痛、疲乏、失眠。右肋骨下疼痛,胸骨疼痛。患者长期服用减肥药，无间断

　　血液检验结果：

　　WBC：15.4×109/L RBC：5.53×1012/L

　　NC: 85.2% Hb: 150g/L

　　LC: 11.6% PLT： 1321 ×109/L

　　MO: 1.8% RDW: 17.8 %

　　EOS: 0.9% BAS: 0.5%

　　8．血红蛋白测定

　　方法：氰化高铁血红蛋白法全自动血细胞分析仪

　　原理：除Hbs外，多种血红蛋白（Hb）均可被高铁氢化钾氧化成高铁血红蛋白（Hi），再与CN- 结合生成稳定的棕红色氧化高铁血红蛋白（HiCN），在540nm处有一吸收峰

　　9、全自动血细胞分析仪

　　多项参数测定

　　仪器组成:1.主机 2 终端机 3 打印机

　　阅读报告:1.18、23 项参数中英文报告2.图解3. 警告标志4. 含义报告

　　库尔特原理：孔径阻抗细胞计数原理

　　白细胞自动化分类

　　二项式分类粒细胞和非粒细胞

　　三项式分类淋巴、中性粒细胞和中间细胞

　　五项式分类嗜中、嗜碱、嗜酸、淋巴、单核细胞

　　第三章贫血

　　一、贫血总论

　　1．贫血Anemia：

　　是一种症状，是指人体单位体积循环血中，红细胞计数、血红蛋白含量和红细胞比积低于正常参考值——即称为贫血

　　2．RBC:主要功能：携带O2、运输CO2

　　膜组成：膜糖、膜脂、膜蛋白

　　膜结构：不对称性、流动性、骨架

　　膜功能：物质运输、抗原性、变形性、免疫功能

　　Hb:是红细胞中的运输蛋白，主要功能是吸收肺部大量CO2并输送到身体各组织

　　Hct:是指抗凝全血经离心沉淀后，测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值

　　3．贫血各系统的表现：

　　全身软弱无力、疲乏困倦、皮肤粘膜苍白

　　呼吸及循环系统：心悸、气短、心率加快、呼吸加重等，严重者发生心力衰竭

　　消化系统：食欲不振、腹胀、恶心、呕吐、消化不良、腹泻或便秘等

　　泌尿生殖系统：尿可出现少量蛋白，肾功能轻度减低，甚至发生尿少、尿闭和急性肾功能衰竭神经系统：头痛、头晕、畏寒、反应迟钝、耳鸣、眼花

　　4．贫血的病因与发病机制分类

　　红细胞生成减少：骨髓造血功能障碍、红细胞生成素产生缺陷、造血物质缺乏或失利用

　　红细胞破坏增多：

　　红细胞内在异常：膜缺陷、酶缺陷、珠蛋白链生成异常、阵发性睡眠性血红蛋白尿

　　红细胞外在异常：免疫性、机械性、化学与物理、感染、单核吞噬细胞系统功能亢进

　　红细胞丢失过多：急性、慢性失血

　　贫血分类

　　贫血发病病因分类

　　缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血

　　溶血性贫血、血红蛋白病

　　红细胞膜缺陷致溶贫

　　自身免疫性溶贫

　　阵发性睡眠性血红蛋白病

　　红细胞形态分类

　　类型 MCV（f l）MCH (pg)

　　大细胞型＞100 ＞32

　　正常80 ~ 94 26 ~ 32

　　单纯小细胞＜80 ＜26

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